Pure Saposhnikovia divaricata oil สำหรับเทียนและสบู่ขายส่งน้ำมันหอมระเหยใหม่สำหรับ reed burner diffusers

คำอธิบายสั้น ๆ :

 

2.1. การเตรียม SDE

เหง้าของ SD ถูกซื้อเป็นสมุนไพรแห้งจาก Hanherb Co. (Guri, Korea) วัสดุจากพืชได้รับการยืนยันทางอนุกรมวิธานโดย Dr. Go-Ya Choi จากสถาบันการแพทย์ตะวันออกแห่งเกาหลี (KIOM) ตัวอย่างบัตรกำนัล (หมายเลข 2014 SDE-6) ถูกฝากไว้ที่ Korean Herbarium of Standard Herbal Resources เหง้าแห้งของ SD (320 กรัม) ถูกสกัดสองครั้งด้วยเอธานอล 70% (พร้อมกรดไหลย้อน 2 ชั่วโมง) จากนั้นสารสกัดจะถูกทำให้เข้มข้นภายใต้ความดันที่ลดลง ยาต้มถูกกรอง, ไลโอฟิไลซ์ และเก็บไว้ที่ 4°ซ ผลผลิตของสารสกัดแห้งจากวัตถุดิบเริ่มต้นคือ 48.13% (w/w)

 

2.2. การวิเคราะห์โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) เชิงปริมาณ

การวิเคราะห์โครมาโตกราฟีดำเนินการด้วยระบบ HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) และเครื่องตรวจจับอาร์เรย์โฟโตไดโอด สำหรับการวิเคราะห์ HPLC ของ SDE หลักการO-มาตรฐานกลูโคซิลซิมิฟูกินถูกซื้อจากสถาบันส่งเสริมอุตสาหกรรมยาแผนโบราณแห่งเกาหลี (คยองซาน เกาหลี) และวินาที-O-กลูโคซิลฮาเมาดอล และ 4′-O-β-ดี-กลูโคซิล-5-O-methylvisamminol ถูกแยกออกภายในห้องปฏิบัติการของเรา และระบุโดยการวิเคราะห์สเปกตรัม โดยหลักๆ คือ NMR และ MS

ตัวอย่าง SDE (0.1 มก.) ถูกละลายในเอธานอล 70% (10 มล.) ทำการแยกโครมาโตกราฟีด้วยคอลัมน์ XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 มม., 5μม., Waters Co., มิลฟอร์ด, แมสซาชูเซตส์, สหรัฐอเมริกา) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยอะซีโตไนไตรล์ (A) และกรดอะซิติก 0.1% ในน้ำ (B) ที่อัตราการไหล 1.0 มล./นาที ใช้โปรแกรมการไล่ระดับสีหลายขั้นตอนดังนี้: 5% A (0 นาที), 5–20% A (0–10 นาที), 20% A (10–23 นาที) และ 20–65% A (23–40 นาที) ). ความยาวคลื่นการตรวจจับถูกสแกนที่ 210–400 นาโนเมตร และบันทึกที่ 254 นาโนเมตร ปริมาตรการฉีดคือ 10.0μL. สารละลายมาตรฐานสำหรับการกำหนดหาโครโมน 3 โครโมนถูกเตรียมที่ความเข้มข้นสุดท้ายที่ 7.781 มก./มล. (ไพรม์-O-กลูโคซิลซิมิฟูจิน), 31.125 มก./มล. (4′-O-β-ดี-กลูโคซิล-5-O-เมทิลวิแอมมินอล) และ 31.125 มก./มล. (วินาที-O-กลูโคซิลฮาเมาดอล) ในเมทานอล และเก็บไว้ที่ 4°C

2.3. การประเมินฤทธิ์ต้านการอักเสบในหลอดทดลอง

2.3.1. การเพาะเลี้ยงเซลล์และการบำบัดตัวอย่าง

เซลล์ RAW 264.7 ได้มาจาก American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) และปลูกในอาหาร DMEM ที่มียาปฏิชีวนะ 1% และ FBS 5.5% เซลล์ถูกบ่มในบรรยากาศที่มีความชื้นของ 5% CO2 ที่ 37°C เพื่อกระตุ้นเซลล์ตัวกลางจะถูกแทนที่ด้วยตัวกลาง DMEM สดและ lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ที่ 1μกรัม/มิลลิลิตรถูกเติมเมื่อมีหรือไม่มี SDE (200 หรือ 400μกรัม/มิลลิลิตร) เป็นเวลาเพิ่มเติม 24 ชั่วโมง

2.3.2. การหาปริมาณไนตริกออกไซด์ (NO), พรอสตาแกลนดิน E2 (PGE2), ปัจจัยเนื้อร้ายของเนื้องอก-α(ทีเอ็นเอฟ-α) และการผลิตอินเตอร์ลิวคิน-6 (IL-6)

เซลล์ถูกบำบัดด้วย SDE และกระตุ้นด้วย LPS เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ไม่มีการวิเคราะห์การผลิตโดยการวัดไนไตรท์โดยใช้รีเอเจนต์ Griess ตามการศึกษาก่อนหน้านี้ [12- การหลั่งของไซโตไคน์อักเสบ PGE2, TNF-αและ IL-6 ถูกกำหนดโดยใช้ชุด ELISA (ระบบ R&D) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ผลกระทบของ SDE ต่อการผลิต NO และไซโตไคน์ถูกกำหนดที่ 540 นาโนเมตรหรือ 450 นาโนเมตรโดยใช้ Wallac EnVision™เครื่องอ่านไมโครเพลท (PerkinElmer)

2.4. การประเมินฤทธิ์ต้านโรคข้อเข่าเสื่อมในวีโว่

2.4.1. สัตว์

หนู Sprague-Dawley เพศผู้ (อายุ 7 สัปดาห์) ซื้อจาก Samtako Inc. (Osan, เกาหลี) และเลี้ยงภายใต้สภาวะควบคุมโดยมีวงจรแสง/มืด 12 ชั่วโมงที่°C และความชื้น % หนูได้รับอาหารและน้ำในห้องปฏิบัติการไม่จำกัด- ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดดำเนินการตามแนวทางของสถาบันสุขภาพแห่งชาติ (NIH) และได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ของมหาวิทยาลัยแทจอน (แทจอน สาธารณรัฐเกาหลี)

2.4.2. การเหนี่ยวนำ OA ด้วย MIA ในหนู

สัตว์ได้รับการสุ่มและมอบหมายให้กลุ่มบำบัดก่อนเริ่มการศึกษา (ต่อกลุ่ม) สารละลาย MIA (3 มก./50μL ของน้ำเกลือ 0.9%) ถูกฉีดโดยตรงเข้าไปในช่องว่างภายในข้อของเข่าขวาภายใต้การดมยาสลบที่เกิดจากส่วนผสมของคีตามีนและไซลาซีน หนูถูกแบ่งแบบสุ่มออกเป็นสี่กลุ่ม: (1) กลุ่มน้ำเกลือที่ไม่มีการฉีด MIA (2) กลุ่ม MIA ที่มีการฉีด MIA (3) กลุ่มที่ได้รับ SDE (200 มก./กก.) พร้อมการฉีด MIA และ (4 ) กลุ่มที่ได้รับอินโดเมธาซิน (IM-) (2 มก./กก.) ด้วยการฉีด MIA หนูถูกบริหารให้ทางปากด้วย SDE และ IM 1 สัปดาห์ก่อนการฉีด MIA เป็นเวลา 4 สัปดาห์ ปริมาณของ SDE และ IM ที่ใช้ในการศึกษานี้ขึ้นอยู่กับปริมาณที่ใช้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ [10-13-14].

2.4.3. การวัดการกระจายน้ำหนักของ Hindpaw

หลังจากการเหนี่ยวนำ OA ความสมดุลเดิมในความสามารถในการรับน้ำหนักของขาหลังถูกรบกวน เครื่องทดสอบความไร้ความจุ (เครื่องมือ Linton, Norfolk, UK) ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงในความทนทานต่อการรับน้ำหนัก หนูถูกวางอย่างระมัดระวังในห้องตรวจวัด แรงรับน้ำหนักที่กระทำโดยแขนขาหลังนั้นเฉลี่ยในช่วงเวลา 3 วินาที อัตราส่วนการกระจายน้ำหนักคำนวณโดยสมการต่อไปนี้: [น้ำหนักบนขาหลังขวา/(น้ำหนักบนขาหลังขวา + น้ำหนักบนขาหลังซ้าย)] × 100 [15].

2.4.4. การวัดระดับไซโตไคน์ในซีรั่ม

ตัวอย่างเลือดถูกปั่นแยกที่ 1,500 กรัม เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4°C; จากนั้นซีรั่มจะถูกรวบรวมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ −70°C จนกระทั่งใช้งาน ระดับของ IL-1β, IL-6, TNF-αและ PGE2 ในซีรั่มถูกวัดโดยใช้ชุด ELISA จาก R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

2.4.5. การวิเคราะห์ RT-PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์

Total RNA ถูกสกัดจากเนื้อเยื่อข้อเข่าโดยใช้ TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) คัดลอกแบบย้อนกลับลงใน cDNA และ PCR-aplification โดยใช้ชุด TM One Step RT PCR พร้อม SYBR green (Applied Biosystems , แกรนด์ไอแลนด์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ดำเนินการโดยใช้ระบบ PCR แบบเรียลไทม์ Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) ลำดับไพรเมอร์และลำดับโพรบแสดงอยู่ในตาราง1- จำนวนส่วนของ cDNA ตัวอย่างและ GAPDH cDNA จำนวนเท่ากันถูกขยายด้วยส่วนผสมหลักของ TaqMan® Universal PCR ที่มี DNA polymerase ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Applied Biosystems, Foster, CA, USA) สภาวะ PCR คือ 2 นาทีที่ 50°C, 10 นาทีที่ 94°C, 15 วินาทีที่ 95°C และ 1 นาทีที่ 60°C เป็นเวลา 40 รอบ ความเข้มข้นของยีนเป้าหมายถูกกำหนดโดยใช้วิธีเปรียบเทียบ Ct (หมายเลขรอบขีดจำกัดที่จุดตัดระหว่างพล็อตการขยายสัญญาณและขีดจำกัด) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ราคา FOB:US $0.5 - 9,999 / ชิ้น

Min.Order จำนวน:100 ชิ้น/ชิ้น

ความสามารถในการจัดหา:10,000 ชิ้น / ชิ้นต่อเดือน