โรงงานน้ำมันหอมระเหยจำนวนมาก | ผู้ผลิตและซัพพลายเออร์น้ำมันหอมระเหยจำนวนมากจากจีน

น้ำมันหอมระเหยจากใบยูคาลิปตัสบริสุทธิ์จากธรรมชาติสำหรับดูแลผิวกาย

วิธีการสกัดหรือแปรรูป: กลั่นด้วยไอน้ำ

การกลั่น ส่วนสกัด:ใบ

ประเทศต้นกำเนิด: ประเทศจีน

การประยุกต์ใช้: กระจายกลิ่น/อโรมาเธอราพี/นวด

อายุการเก็บรักษา: 3 ปี

บริการที่กำหนดเอง: ฉลากและกล่องที่กำหนดเองหรือตามความต้องการของคุณ

ใบรับรอง: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

น้ำมันยูคาลิปตัสทำปฏิกิริยากับเมือกและละลายเสมหะ บรรเทาอาการหายใจไม่ออกและปัญหาทางเดินหายใจอื่นๆ ได้ทันที มีฤทธิ์ขับไล่แมลงได้อย่างมีประสิทธิภาพ เมื่อใช้ในอโรมาเธอราพี จะช่วยให้จิตใจแจ่มใส ประโยชน์ทางการรักษาของน้ำมันยูคาลิปตัสคือคุณสมบัติต้านจุลชีพ ต้านเชื้อแบคทีเรีย ฆ่าเชื้อ คลายกล้ามเนื้อ และต้านไวรัส ใช้น้ำมันยูคาลิปตัสเพื่อบรรเทาอาการผิวหนังและสุขภาพต่างๆ น้ำมันยูคาลิปตัสประกอบด้วยยูคาลิปตอล หรือที่รู้จักกันในชื่อซิเนโอล สารประกอบนี้จะช่วยเสริมสร้างสุขภาพและความเป็นอยู่ที่ดีโดยรวมของคุณ

รายละเอียด
น้ำมันหอมระเหยลาเวนเดอร์ออร์แกนิกบริสุทธิ์จากธรรมชาติเพื่อการดูแลผิวด้วยกลิ่นหอมบำบัด

วิธีการสกัดหรือแปรรูป: กลั่นด้วยไอน้ำ

การกลั่น ส่วนสกัด: ดอกไม้

ประเทศต้นกำเนิด: ประเทศจีน

การประยุกต์ใช้: กระจายกลิ่น/อโรมาเธอราพี/นวด

อายุการเก็บรักษา: 3 ปี

บริการที่กำหนดเอง: ฉลากและกล่องที่กำหนดเองหรือตามความต้องการของคุณ

ใบรับรอง: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

รายละเอียด
น้ำมัน Magnoliae Officmalis Cortex ออร์แกนิกบริสุทธิ์จากธรรมชาติ 100% สำหรับการดูแลผิว

กลิ่นหอมของ Hou Po จะให้รสขมและฉุนทันที จากนั้นจะค่อยๆ เปลี่ยนเป็นความหวานล้ำลึกและอบอุ่น

โฮ่วโปมีความสัมพันธ์กับธาตุดินและธาตุโลหะ ซึ่งความอบอุ่นขมขื่นของโฮ่วโปจะส่งผลอย่างมากต่อชี่และความชื้นแห้ง ด้วยคุณสมบัติเหล่านี้ โฮ่วโปจึงถูกนำมาใช้ในยาจีนเพื่อบรรเทาอาการคั่งค้างและการสะสมในระบบทางเดินอาหาร รวมถึงอาการไอและหายใจมีเสียงหวีดเนื่องจากเสมหะอุดตันปอด

แมกโนเลีย ออฟฟิซินิอัลส์ เป็นไม้ผลัดใบที่มีถิ่นกำเนิดในเทือกเขาและหุบเขาของมณฑลเสฉวน หูเป่ย์ และมณฑลอื่นๆ ของจีน เปลือกไม้ที่มีกลิ่นหอมแรงซึ่งใช้ในตำรับยาจีนโบราณจะถูกเด็ดออกจากลำต้น กิ่งก้าน และราก เก็บเกี่ยวในช่วงเดือนเมษายนถึงมิถุนายน เปลือกไม้หนา เรียบ อุดมไปด้วยน้ำมัน มีสีม่วงด้านใน แวววาวเหมือนผลึก

ผู้ปฏิบัติธรรมอาจพิจารณาการผสม Hou Po กับน้ำมันหอมระเหย Qing Pi เพื่อเป็นส่วนผสมหลักเพื่อสลายการสะสม

รายละเอียด
แพ็คเกจ OEM ที่กำหนดเอง น้ำมัน Macrocephalae Rhizoma จากธรรมชาติ

5-ฟลูออโรยูราซิล (5-FU) เป็นยาเคมีบำบัดที่มีประสิทธิภาพ จึงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการรักษามะเร็งร้ายในระบบทางเดินอาหาร ศีรษะ คอ หน้าอก และรังไข่ และ 5-FU ยังเป็นยาหลักในการรักษามะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักในคลินิก กลไกการออกฤทธิ์ของ 5-FU คือการยับยั้งการเปลี่ยนกรดนิวคลีอิกของยูราซิลเป็นกรดนิวคลีอิกไทมีนในเซลล์มะเร็ง จากนั้นจึงไปกระตุ้นการสังเคราะห์และซ่อมแซมดีเอ็นเอและอาร์เอ็นเอเพื่อให้เกิดฤทธิ์ทำลายเซลล์ (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003) อย่างไรก็ตาม 5-FU ยังก่อให้เกิดอาการท้องร่วงจากเคมีบำบัด (CID) ซึ่งเป็นหนึ่งในอาการไม่พึงประสงค์ที่พบบ่อยที่สุดที่รบกวนผู้ป่วยจำนวนมาก (Filho et al., 2016) อุบัติการณ์ของอาการท้องร่วงในผู้ป่วยที่ได้รับการรักษาด้วย 5-FU สูงถึง 50%–80% ซึ่งส่งผลกระทบอย่างมากต่อความก้าวหน้าและประสิทธิภาพของเคมีบำบัด (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006) ดังนั้น การค้นหาวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพสำหรับ CID ที่เกิดจาก 5-FU จึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง

ปัจจุบันมีการนำการแทรกแซงที่ไม่ใช่ยาและการแทรกแซงด้วยยาเข้ามาใช้ในการรักษาทางคลินิกสำหรับโรค CID การแทรกแซงที่ไม่ใช่ยาประกอบด้วยการควบคุมอาหารที่เหมาะสม และการเสริมด้วยเกลือ น้ำตาล และสารอาหารอื่นๆ ยา เช่น โลเพอราไมด์และออกเทรโอไทด์ มักถูกนำมาใช้ในการรักษาโรค CID ด้วยวิธีการรักษาอาการท้องร่วง (Benson et al., 2004) นอกจากนี้ การแพทย์พื้นบ้าน (ethnomedicine) ยังถูกนำมาใช้ในการรักษา CID ด้วยวิธีการเฉพาะของตนเองในหลายประเทศ การแพทย์แผนจีน (TCM) เป็นหนึ่งในการแพทย์พื้นบ้านทั่วไปที่มีการใช้มานานกว่า 2,000 ปีในประเทศแถบเอเชียตะวันออก ได้แก่ จีน ญี่ปุ่น และเกาหลี (Qi et al., 2010) การแพทย์แผนจีนเชื่อว่ายาเคมีบำบัดจะกระตุ้นให้เกิดการใช้ชี่ ม้ามพร่อง กระเพาะอาหารไม่สมดุล และความชื้นในลำไส้ ส่งผลให้เกิดภาวะการนำไฟฟ้าผิดปกติของลำไส้ ในทฤษฎีการแพทย์แผนจีน กลยุทธ์การรักษา CID ควรเน้นที่การเสริม Qi และม้ามให้แข็งแรงเป็นหลัก (Wang et al., 1994)

รากแห้งของแอแทรคทิโลเดส มาโครเซฟาลาKoidz. (AM) และโสม PanaxCA Mey. (PG) เป็นยาสมุนไพรทั่วไปในการแพทย์แผนจีนที่มีฤทธิ์เสริมพลังชี่และเสริมสร้างม้ามเช่นเดียวกับ (Li et al., 2014) โดยทั่วไป AM และ PG จะถูกใช้เป็นคู่สมุนไพร (ซึ่งเป็นรูปแบบที่ง่ายที่สุดของความเข้ากันได้ของสมุนไพรจีน) โดยมีฤทธิ์เสริมพลังชี่และเสริมสร้างม้ามเพื่อรักษาอาการท้องเสีย ตัวอย่างเช่น AM และ PG ได้รับการบันทึกไว้ในตำรับยาแก้ท้องเสียแบบคลาสสิก เช่น Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang จากไท่ผิง ฮุ่ยหมิน เหอจี จู ฟาง(ราชวงศ์ซ่งประเทศจีน) และบูจงยี่ชีถังจากพี่เว่ยหลุน(ราชวงศ์หยวน ประเทศจีน) (รูปที่ 1) งานวิจัยก่อนหน้านี้หลายชิ้นรายงานว่าสูตรทั้งสามสูตรมีความสามารถในการบรรเทาอาการ CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016) นอกจากนี้ งานวิจัยก่อนหน้านี้ของเรายังแสดงให้เห็นว่า Shenzhu Capsule ซึ่งมีเพียง AM และ PG อาจมีผลต่อการรักษาโรคท้องร่วง โรคลำไส้ใหญ่อักเสบ (xiexie syndrome) และโรคทางเดินอาหารอื่นๆ (Feng et al., 2018) อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีงานวิจัยใดที่กล่าวถึงผลและกลไกของ AM และ PG ในการรักษา CID ไม่ว่าจะใช้ร่วมกันหรือใช้เดี่ยวๆ

ปัจจุบันจุลินทรีย์ในลำไส้ถือเป็นปัจจัยสำคัญในการทำความเข้าใจกลไกการรักษาของแพทย์แผนจีน (Feng et al., 2019) การศึกษาสมัยใหม่ชี้ให้เห็นว่าจุลินทรีย์ในลำไส้มีบทบาทสำคัญในการรักษาสมดุลภายในลำไส้ จุลินทรีย์ในลำไส้ที่มีสุขภาพดีมีส่วนช่วยในการปกป้องเยื่อบุลำไส้ การเผาผลาญอาหาร สมดุลและการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน และการยับยั้งเชื้อโรค (Thursby and Juge, 2017; Pickard et al., 2017) จุลินทรีย์ในลำไส้ที่ผิดปกติจะส่งผลกระทบต่อการทำงานทางสรีรวิทยาและภูมิคุ้มกันของร่างกายมนุษย์ทั้งทางตรงและทางอ้อม ทำให้เกิดอาการข้างเคียง เช่น ท้องเสีย (Patel et al., 2016; Zhao and Shen, 2010) งานวิจัยแสดงให้เห็นว่า 5-FU เปลี่ยนแปลงโครงสร้างของจุลินทรีย์ในลำไส้ในหนูที่ท้องเสียอย่างเห็นได้ชัด (Li et al., 2017) ดังนั้น ผลของ AM และ PM ต่ออาการท้องเสียที่เกิดจาก 5-FU อาจเกิดจากจุลินทรีย์ในลำไส้ อย่างไรก็ตาม ยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัดว่าการใช้ AM และ PG เพียงอย่างเดียวหรือการใช้ร่วมกันจะสามารถป้องกันอาการท้องเสียที่เกิดจาก 5-FU โดยการปรับเปลี่ยนจุลินทรีย์ในลำไส้ได้หรือไม่

เพื่อศึกษาฤทธิ์ต้านอาการท้องร่วงและกลไกพื้นฐานของ AM และ PG เราได้ใช้ 5-FU เพื่อจำลองแบบจำลองอาการท้องร่วงในหนู ในที่นี้ เรามุ่งเน้นไปที่ผลที่อาจเกิดขึ้นจากการให้ยาแบบเดี่ยวและแบบผสม (AP)แอแทรคทิโลเดส มาโครเซฟาลาน้ำมันหอมระเหย (AMO) และโสม Panaxซาโปนินรวม (PGS) ซึ่งเป็นส่วนประกอบสำคัญที่สกัดจาก AM และ PG ตามลำดับ มีผลต่ออาการท้องเสีย พยาธิสภาพของลำไส้ และโครงสร้างของจุลินทรีย์หลังการให้เคมีบำบัด 5-FU

รายละเอียด
น้ำมันยูคอมเมียโฟเลียมบริสุทธิ์จากธรรมชาติ 100% สำหรับการดูแลผิว

ยูคอมเมีย อุลโมอิเดส(EU) (เรียกกันทั่วไปว่า “Du Zhong” ในภาษาจีน) อยู่ในวงศ์ Eucommiaceae ซึ่งเป็นสกุลของต้นไม้ขนาดเล็กที่มีถิ่นกำเนิดในจีนตอนกลาง [1]. พืชชนิดนี้มีการเพาะปลูกอย่างกว้างขวางในประเทศจีนเนื่องจากมีความสำคัญทางยา มีสารประกอบประมาณ 112 ชนิดที่แยกได้จาก EU ซึ่งรวมถึงลิกแนน ไอริดอยด์ ฟีนอลิก สเตียรอยด์ และสารประกอบอื่นๆ สูตรสมุนไพรเสริมของพืชชนิดนี้ (เช่น ชารสอร่อย) แสดงให้เห็นถึงสรรพคุณทางยา ใบของ EU มีฤทธิ์สูงกว่าที่เกี่ยวข้องกับเปลือก ดอก และผล [2-3]. มีรายงานว่าใบของ EU ช่วยเพิ่มความแข็งแรงของกระดูกและกล้ามเนื้อของร่างกาย [4] ส่งผลให้มีอายุยืนยาวและส่งเสริมความสมบูรณ์พันธุ์ในมนุษย์ [5]. มีรายงานว่าสูตรชาแสนอร่อยที่ทำจากใบของ EU ช่วยลดไขมันและเพิ่มการเผาผลาญพลังงาน สารประกอบฟลาโวนอยด์ (เช่น รูติน กรดคลอโรจีนิก กรดเฟอรูลิก และกรดคาเฟอิก) มีรายงานว่ามีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในใบของ EU [6].

แม้ว่าจะมีเอกสารเกี่ยวกับคุณสมบัติทางพฤกษเคมีของ EU อยู่มากมาย แต่ยังมีงานวิจัยเกี่ยวกับคุณสมบัติทางเภสัชวิทยาของสารประกอบต่างๆ ที่สกัดจากเปลือก เมล็ด ลำต้น และใบของ EU อยู่น้อยมาก บทความวิจัยนี้จะอธิบายข้อมูลโดยละเอียดเกี่ยวกับสารประกอบต่างๆ ที่สกัดจากส่วนต่างๆ ของ EU (เปลือก เมล็ด ลำต้น และใบ) และการประยุกต์ใช้สารประกอบเหล่านี้ในสรรพคุณส่งเสริมสุขภาพ โดยมีหลักฐานทางวิทยาศาสตร์รองรับ และเพื่อเป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับการประยุกต์ใช้ EU

รายละเอียด
น้ำมัน Houttuynia cordata บริสุทธิ์จากธรรมชาติ น้ำมัน Houttuynia cordata น้ำมัน Lchthammolum

ในประเทศกำลังพัฒนาส่วนใหญ่ ประชากร 70-95% พึ่งพายาแผนโบราณเพื่อการดูแลสุขภาพขั้นพื้นฐาน และจากจำนวนนี้ 85% ของประชากรใช้พืชหรือสารสกัดจากพืชเป็นสารออกฤทธิ์1] การค้นหาสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพใหม่ๆ จากพืชมักขึ้นอยู่กับข้อมูลเฉพาะทางชาติพันธุ์และพื้นบ้านที่ได้รับจากแพทย์ในท้องถิ่น และยังคงถือเป็นแหล่งข้อมูลสำคัญสำหรับการค้นพบยา ในอินเดีย มียาประมาณ 2,000 ชนิดที่มีต้นกำเนิดจากพืช2] เนื่องจากความสนใจในการใช้พืชสมุนไพรอย่างแพร่หลาย บทวิจารณ์ปัจจุบันเกี่ยวกับHouttuynia cordataThunb. ให้ข้อมูลที่ทันสมัยพร้อมอ้างอิงถึงการศึกษาทางพฤกษศาสตร์ เชิงพาณิชย์ ชาติพันธุ์เภสัชวิทยา ไฟโตเคมี และเภสัชวิทยาที่ปรากฏในเอกสารเอช. คอร์ดาต้าธันบ์. อยู่ในตระกูลวงศ์ซอรูเรซีและเป็นที่รู้จักกันทั่วไปในชื่อหางกิ้งก่าจีน เป็นไม้ล้มลุกยืนต้น มีเหง้าแบบสโตโลนิเฟอรัส ที่มีเคมีไทป์สองแบบที่แตกต่างกัน3,4เคมีไทป์จีนของสายพันธุ์นี้พบในสภาพแวดล้อมป่าและกึ่งป่าในภาคตะวันออกเฉียงเหนือของอินเดียตั้งแต่เดือนเมษายนถึงกันยายน5,6,7-เอช. คอร์ดาต้ามีอยู่ในอินเดีย โดยเฉพาะในหุบเขาพรหมบุตรของรัฐอัสสัม และนำมาใช้โดยชนเผ่าต่างๆ ในรัฐอัสสัมในรูปแบบของผัก ตลอดจนเป็นยารักษาโรคต่างๆ ตามประเพณี

รายละเอียด
ผู้ผลิตน้ำมัน Arctium lappa บริสุทธิ์ 100% – น้ำมัน Arctium lappa มะนาวธรรมชาติพร้อมใบรับรองการประกันคุณภาพ

ประโยชน์ต่อสุขภาพ

รากเบอร์ด็อกมักรับประทานกัน แต่ยังสามารถนำมาตากแห้งแล้วชงเป็นชาได้อีกด้วย รากเบอร์ด็อกยังเป็นแหล่งของอินูลินพรีไบโอติกไฟเบอร์ที่ช่วยย่อยอาหารและปรับปรุงสุขภาพลำไส้ นอกจากนี้ รากนี้ยังมีฟลาโวนอยด์ (สารอาหารพืช)สารไฟโตเคมีคัลและสารต้านอนุมูลอิสระที่ทราบกันดีว่ามีประโยชน์ต่อสุขภาพ

นอกจากนี้รากหญ้าเจ้าชู้ยังมีประโยชน์อื่นๆ อีกด้วย เช่น:

ลดการอักเสบเรื้อรัง

รากหญ้าเจ้าชู้มีสารต้านอนุมูลอิสระหลายชนิด เช่น เคอร์ซิติน กรดฟีนอลิก และลูทีโอลิน ซึ่งสามารถช่วยปกป้องเซลล์ของคุณจากอนุมูลอิสระสารต้านอนุมูลอิสระเหล่านี้ช่วยลดการอักเสบทั่วร่างกาย

ความเสี่ยงด้านสุขภาพ

รากเบอร์ด็อกถือว่าปลอดภัยสำหรับรับประทานหรือดื่มเป็นชา อย่างไรก็ตาม พืชชนิดนี้มีลักษณะคล้ายกับต้นเบลลาดอนน่าไนท์เชดซึ่งมีพิษ ขอแนะนำให้ซื้อรากเบอร์ด็อกจากผู้ขายที่เชื่อถือได้เท่านั้น และหลีกเลี่ยงการเก็บรากเบอร์ด็อกเอง นอกจากนี้ ยังมีข้อมูลเกี่ยวกับผลกระทบต่อเด็กหรือสตรีมีครรภ์น้อยมาก โปรดปรึกษาแพทย์ก่อนใช้รากเบอร์ด็อกกับเด็กหรือหากคุณกำลังตั้งครรภ์

ความเสี่ยงต่อสุขภาพอื่นๆ ที่อาจเกิดขึ้นได้ซึ่งควรพิจารณาหากใช้รากหญ้าเจ้าชู้:

ภาวะขาดน้ำเพิ่มขึ้น

รากเบอร์ด็อกมีฤทธิ์ขับปัสสาวะตามธรรมชาติ ซึ่งอาจทำให้เกิดภาวะขาดน้ำได้ หากคุณรับประทานยาขับปัสสาวะหรือยาขับปัสสาวะอื่นๆ คุณไม่ควรรับประทานรากเบอร์ด็อก หากคุณรับประทานยาเหล่านี้ สิ่งสำคัญคือต้องตระหนักถึงยา สมุนไพร และส่วนผสมอื่นๆ ที่อาจทำให้เกิดภาวะขาดน้ำ

อาการแพ้

หากคุณมีความไวหรือมีประวัติการแพ้ดอกเดซี่ แร็กวีด หรือเบญจมาศ คุณจะมีความเสี่ยงต่อการเกิดอาการแพ้รากหญ้าเจ้าชู้เพิ่มมากขึ้น

รายละเอียด
ราคาขายส่งจำนวนมาก 100% น้ำมัน AsariRadix Et Rhizoma บริสุทธิ์ ผ่อนคลายด้วยกลิ่นหอมบำบัด Eucalyptus globulus

การศึกษาในสัตว์และในหลอดทดลองได้ศึกษาถึงฤทธิ์ต้านเชื้อรา ต้านการอักเสบ และฤทธิ์ต่อระบบหัวใจและหลอดเลือดของซัสซาฟราสและส่วนประกอบต่างๆ อย่างไรก็ตาม การทดลองทางคลินิกยังขาดอยู่ และซัสซาฟราสไม่ถือว่าปลอดภัยต่อการใช้ ซาโฟรล ซึ่งเป็นส่วนประกอบหลักของเปลือกและน้ำมันรากซัสซาฟราส ถูกห้ามใช้โดยสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา (FDA) รวมถึงใช้เป็นสารแต่งกลิ่นรส และไม่ควรใช้ทั้งภายในและภายนอก เนื่องจากอาจก่อให้เกิดมะเร็ง ซาโฟรลถูกนำมาใช้ในการผลิต 3,4-เมทิลีน-ไดออกซีเมทแอมเฟตามีน (MDMA) ที่ผิดกฎหมาย หรือที่รู้จักกันในชื่อทางการค้าว่า “เอ็กสตาซี” หรือ “มอลลี” และสำนักงานปราบปรามยาเสพติดแห่งสหรัฐอเมริกากำลังตรวจสอบการจำหน่ายซาโฟรลและน้ำมันซัสซาฟราส

รายละเอียด
ราคาส่งจำนวนมาก 100% น้ำมันหอมระเหยบริสุทธิ์ Stellariae Radix (ใหม่) ผ่อนคลายด้วยอโรมาเธอราพี ยูคาลิปตัส โกลบูลัส

ตำรายาจีน (ฉบับปี 2020) กำหนดว่าสารสกัดเมทานอลของ YCH ไม่ควรน้อยกว่า 20.0% [2] โดยไม่ได้ระบุตัวบ่งชี้การประเมินคุณภาพอื่น ๆ ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าปริมาณสารสกัดเมทานอลจากตัวอย่างธรรมชาติและตัวอย่างที่เพาะเลี้ยงเป็นไปตามมาตรฐานเภสัชตำรับ และไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างตัวอย่างทั้งสอง ดังนั้นจึงไม่มีความแตกต่างด้านคุณภาพที่ชัดเจนระหว่างตัวอย่างธรรมชาติและตัวอย่างที่เพาะเลี้ยงตามดัชนีดังกล่าว อย่างไรก็ตาม ปริมาณสเตอรอลรวมและฟลาโวนอยด์รวมในตัวอย่างธรรมชาติสูงกว่าตัวอย่างที่เพาะเลี้ยงอย่างมีนัยสำคัญ การวิเคราะห์เมตาโบโลมิกเพิ่มเติมเผยให้เห็นความหลากหลายของเมตาบอไลต์ระหว่างตัวอย่างธรรมชาติและตัวอย่างที่เพาะเลี้ยง นอกจากนี้ ยังได้มีการคัดกรองเมตาบอไลต์ที่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ 97 ชนิด ซึ่งระบุไว้ในตารางเสริม S2ในบรรดาสารเมแทบอไลต์ที่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเหล่านี้ ได้แก่ β-sitosterol (รหัสประจำตัวคือ M397T42) และอนุพันธ์ของเคอร์ซิติน (M447T204_2) ซึ่งมีรายงานว่าเป็นสารออกฤทธิ์ ส่วนประกอบที่ไม่เคยมีการรายงานมาก่อน เช่น ไตรโกเนลลีน (M138T291_2), เบทาอีน (M118T277_2), ฟัสติน (M269T36), โรทีโนน (M241T189), อาร์คติน (M557T165) และกรดโลแกนิก (M399T284_2) ก็รวมอยู่ในสารเมแทบอไลต์ที่แตกต่างกัน ส่วนประกอบเหล่านี้มีบทบาทหลากหลายในการต้านอนุมูลอิสระ ต้านการอักเสบ กำจัดอนุมูลอิสระ ต้านมะเร็ง และรักษาภาวะหลอดเลือดแดงแข็งตัว ดังนั้นจึงอาจเป็นสารออกฤทธิ์ใหม่ที่คาดว่าจะเป็นในยา YCH ปริมาณของสารออกฤทธิ์เป็นตัวกำหนดประสิทธิภาพและคุณภาพของสารยา [7] โดยสรุป สารสกัดเมทานอลซึ่งเป็นดัชนีประเมินคุณภาพเพียงชนิดเดียวของ YCH ยังมีข้อจำกัดบางประการ และจำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับเครื่องหมายคุณภาพที่เฉพาะเจาะจงยิ่งขึ้น พบว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในสเตอรอลทั้งหมด ฟลาโวนอยด์ทั้งหมด และเนื้อหาของสารเมตาบอไลต์ที่แตกต่างกันอื่นๆ ระหว่าง YCH จากธรรมชาติและ YCH ที่เพาะเลี้ยง ดังนั้นจึงอาจมีความแตกต่างด้านคุณภาพระหว่าง YCH เหล่านี้อยู่บ้าง ในขณะเดียวกัน ส่วนประกอบสำคัญที่ค้นพบใหม่ใน YCH อาจเป็นค่าอ้างอิงที่สำคัญสำหรับการศึกษาพื้นฐานการทำงานของ YCH และการพัฒนาแหล่งทรัพยากร YCH ต่อไป

ความสำคัญของวัตถุดิบยาแท้ได้รับการยอมรับมานานแล้วในภูมิภาคเฉพาะของแหล่งกำเนิดยาสมุนไพรจีนที่มีคุณภาพเยี่ยม8]. คุณภาพสูงเป็นคุณสมบัติสำคัญของวัตถุดิบยาแท้ และถิ่นที่อยู่ก็เป็นปัจจัยสำคัญที่ส่งผลต่อคุณภาพของวัตถุดิบดังกล่าว นับตั้งแต่ YCH เริ่มถูกนำมาใช้เป็นยา YCH ป่าก็ถูกครอบครองโดย YCH มานานแล้ว หลังจากการนำ YCH เข้ามาและเลี้ยงในมณฑลหนิงเซี่ยอย่างประสบความสำเร็จในช่วงทศวรรษ 1980 แหล่งที่มาของวัตถุดิบยา Yinchaihu ก็ค่อยๆ เปลี่ยนจาก YCH ป่ามาเป็น YCH ที่เพาะปลูก จากการศึกษาแหล่ง YCH ก่อนหน้านี้ [9] และจากการสำรวจภาคสนามของกลุ่มวิจัยของเรา พบว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในพื้นที่กระจายตัวของวัตถุดิบยาสมุนไพรที่เพาะปลูกและวัตถุดิบยาป่า YCH ป่าส่วนใหญ่กระจายตัวอยู่ในเขตปกครองตนเองหนิงเซี่ยหุย มณฑลส่านซี ติดกับเขตแห้งแล้งของมองโกเลียในและตอนกลางของหนิงเซี่ย โดยเฉพาะอย่างยิ่งทุ่งหญ้าทะเลทรายในพื้นที่เหล่านี้เป็นแหล่งที่อยู่อาศัยที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเจริญเติบโตของ YCH ในทางตรงกันข้าม YCH ที่เพาะปลูกส่วนใหญ่กระจายตัวอยู่ทางตอนใต้ของพื้นที่กระจายตัวของวัตถุดิบยาป่า เช่น อำเภอถงซิน (เขตเพาะปลูก I) และพื้นที่โดยรอบ ซึ่งกลายเป็นฐานการเพาะปลูกและการผลิตที่ใหญ่ที่สุดในประเทศจีน และอำเภอเผิงหยาง (เขตเพาะปลูก II) ซึ่งตั้งอยู่ทางตอนใต้และเป็นพื้นที่ผลิต YCH ที่เพาะปลูกอีกแห่งหนึ่ง นอกจากนี้ แหล่งที่อยู่อาศัยของพื้นที่เพาะปลูกทั้งสองแห่งข้างต้นไม่ใช่ทุ่งหญ้าทะเลทราย ดังนั้น นอกจากรูปแบบการผลิตแล้ว ยังมีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในแหล่งที่อยู่อาศัยของ YCH ป่าและ YCH ที่เพาะปลูก แหล่งที่อยู่อาศัยเป็นปัจจัยสำคัญที่มีผลต่อคุณภาพของวัตถุดิบยาสมุนไพร ถิ่นที่อยู่อาศัยที่แตกต่างกันจะส่งผลต่อการก่อตัวและการสะสมของสารเมตาบอไลต์รองในพืช ส่งผลให้คุณภาพของผลิตภัณฑ์ทางยาได้รับผลกระทบ10,11] ดังนั้น ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในปริมาณฟลาโวนอยด์ทั้งหมดและสเตอรอลทั้งหมด และการแสดงออกของเมตาบอไลต์ 53 ชนิดที่เราพบในการศึกษานี้อาจเป็นผลมาจากการจัดการภาคสนามและความแตกต่างของถิ่นที่อยู่อาศัย

หนึ่งในปัจจัยหลักที่สภาพแวดล้อมมีอิทธิพลต่อคุณภาพของวัตถุดิบทางยาคือการสร้างความเครียดให้กับพืชต้นทาง ความเครียดจากสภาพแวดล้อมในระดับปานกลางมีแนวโน้มที่จะกระตุ้นการสะสมของสารเมตาบอไลต์ทุติยภูมิ [12,13สมมติฐานสมดุลการเจริญเติบโต/การแยกตัวระบุว่า เมื่อมีสารอาหารเพียงพอ พืชจะเจริญเติบโตเป็นหลัก ในขณะที่เมื่อขาดสารอาหาร พืชจะแยกตัวเป็นหลักและผลิตเมแทบอไลต์รองมากขึ้น14] ความเครียดจากภัยแล้งที่เกิดจากการขาดน้ำเป็นความเครียดทางสิ่งแวดล้อมหลักที่พืชในพื้นที่แห้งแล้งต้องเผชิญ ในการศึกษานี้ พบว่าสภาพน้ำของ YCH ที่เพาะปลูกมีปริมาณมากกว่า โดยมีปริมาณน้ำฝนรายปีสูงกว่า YCH ตามธรรมชาติอย่างมีนัยสำคัญ (ปริมาณน้ำสำหรับ YCH ที่เพาะปลูก I สูงกว่า YCH ตามธรรมชาติประมาณ 2 เท่า และ YCH ที่เพาะปลูก II สูงกว่า YCH ตามธรรมชาติประมาณ 3.5 เท่า) นอกจากนี้ ดินในสภาพแวดล้อมตามธรรมชาติเป็นดินทราย แต่ดินในพื้นที่เพาะปลูกเป็นดินเหนียว เมื่อเปรียบเทียบกับดินเหนียว ดินทรายมีความสามารถในการกักเก็บน้ำต่ำและมีแนวโน้มที่จะทำให้เกิดความเครียดจากภัยแล้งมากขึ้น ในขณะเดียวกัน กระบวนการเพาะปลูกมักมีการรดน้ำควบคู่ไปด้วย ดังนั้นระดับความเครียดจากภัยแล้งจึงต่ำ YCH ตามธรรมชาติเติบโตในถิ่นที่อยู่ตามธรรมชาติที่แห้งแล้งและรุนแรง ดังนั้นจึงอาจได้รับความเครียดจากภัยแล้งที่รุนแรงกว่า

การควบคุมความเข้มข้นของออสโมซิสเป็นกลไกทางสรีรวิทยาที่สำคัญที่พืชใช้ในการรับมือกับความเครียดจากภาวะแห้งแล้ง และอัลคาลอยด์เป็นตัวควบคุมออสโมซิสที่สำคัญในพืชชั้นสูง [15] บีเทนเป็นสารประกอบแอมโมเนียมควอเทอร์นารีอัลคาลอยด์ที่ละลายน้ำได้ และสามารถทำหน้าที่เป็นสารป้องกันออสโมติก ความเครียดจากภาวะแล้งสามารถลดศักยภาพออสโมติกของเซลล์ ในขณะที่สารป้องกันออสโมติกช่วยรักษาและคงโครงสร้างและความสมบูรณ์ของโมเลกุลขนาดใหญ่ทางชีวภาพ และบรรเทาความเสียหายที่เกิดจากความเครียดจากภาวะแล้งต่อพืชได้อย่างมีประสิทธิภาพ16] ตัวอย่างเช่น ภายใต้ความเครียดจากภัยแล้ง ปริมาณเบทาอีนในหัวบีทและ Lycium barbarum เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ [17,18] ไตรโกเนลลีนเป็นสารควบคุมการเจริญเติบโตของเซลล์ และภายใต้สภาวะแห้งแล้ง ไตรโกเนลลีนสามารถยืดระยะเวลาของวัฏจักรเซลล์พืช ยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ และนำไปสู่การหดตัวของปริมาตรเซลล์ การเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของสารละลายในเซลล์ช่วยให้พืชสามารถควบคุมออสโมซิสและเพิ่มความสามารถในการต้านทานภาวะแห้งแล้ง [19- เจียเอ็กซ์ [20] พบว่าเมื่อความเครียดจากภัยแล้งเพิ่มขึ้น Astragalus membranaceus (แหล่งของยาจีนโบราณ) จะผลิตไตรโกเนลลีนมากขึ้น ซึ่งทำหน้าที่ควบคุมศักยภาพออสโมซิสและเพิ่มความสามารถในการต้านทานความเครียดจากภัยแล้ง ฟลาโวนอยด์ยังแสดงให้เห็นว่ามีบทบาทสำคัญในการต้านทานพืชต่อความเครียดจากภัยแล้งอีกด้วย21,22]. การศึกษาจำนวนมากยืนยันว่าความเครียดจากภัยแล้งระดับปานกลางเอื้อต่อการสะสมของฟลาโวนอยด์ Lang Duo-Yong และคณะ [23] เปรียบเทียบผลกระทบของความเครียดจากภัยแล้งต่อ YCH โดยการควบคุมความสามารถในการอุ้มน้ำในแปลง พบว่าความเครียดจากภัยแล้งยับยั้งการเจริญเติบโตของรากได้ในระดับหนึ่ง แต่ในภาวะเครียดจากภัยแล้งระดับปานกลางและรุนแรง (ความสามารถในการอุ้มน้ำในแปลง 40%) ปริมาณฟลาโวนอยด์ทั้งหมดใน YCH เพิ่มขึ้น ขณะเดียวกัน ภายใต้ภาวะเครียดจากภัยแล้ง ไฟโตสเตอรอลสามารถทำหน้าที่ควบคุมความลื่นไหลและการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์ ยับยั้งการสูญเสียน้ำ และเพิ่มความต้านทานต่อความเครียด [24,25] ดังนั้น การสะสมที่เพิ่มขึ้นของฟลาโวนอยด์ทั้งหมด สเตอรอลทั้งหมด เบตาอีน ไตรโกเนลลีน และเมตาบอไลต์รองอื่นๆ ใน YCH ป่าอาจเกี่ยวข้องกับความเครียดจากภัยแล้งที่มีความรุนแรงสูง

ในการศึกษานี้ ได้ทำการวิเคราะห์การเสริมสมรรถนะวิถี KEGG ของสารเมแทบอไลต์ที่พบว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่าง YCH สายพันธุ์ธรรมชาติและสายพันธุ์ที่เพาะเลี้ยง สารเมแทบอไลต์ที่เสริมสมรรถนะนี้ประกอบด้วยสารที่เกี่ยวข้องกับวิถีเมแทบอไลต์ของกรดแอสคอร์เบตและอัลดาเรต การสังเคราะห์อะมิโนแอซิล-tRNA เมแทบอไลต์ของฮิสทิดีน และเมแทบอไลต์ของเบต้า-อะลานีน วิถีเมแทบอไลต์เหล่านี้มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับกลไกการต้านทานความเครียดของพืช ในบรรดากลไกเหล่านี้ เมแทบอไลต์ของกรดแอสคอร์เบตมีบทบาทสำคัญในการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระของพืช การเผาผลาญคาร์บอนและไนโตรเจน ความต้านทานความเครียด และหน้าที่ทางสรีรวิทยาอื่นๆ26การสังเคราะห์อะมิโนแอซิล-tRNA เป็นเส้นทางสำคัญในการสร้างโปรตีน [27,28] ซึ่งเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โปรตีนที่ทนต่อความเครียด ทั้งวิถีฮิสทิดีนและเบต้า-อะลานีนสามารถเพิ่มความทนทานของพืชต่อความเครียดจากสิ่งแวดล้อมได้ [29,30] สิ่งนี้บ่งชี้เพิ่มเติมว่าความแตกต่างของเมตาบอไลต์ระหว่าง YCH ป่าและที่เพาะเลี้ยงมีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับกระบวนการต้านทานความเครียด

ดินเป็นพื้นฐานทางวัตถุสำหรับการเจริญเติบโตและพัฒนาการของพืชสมุนไพร ไนโตรเจน (N) ฟอสฟอรัส (P) และโพแทสเซียม (K) ในดินเป็นธาตุอาหารสำคัญต่อการเจริญเติบโตและพัฒนาการของพืช อินทรียวัตถุในดินยังประกอบด้วย N, P, K, Zn, Ca, Mg และธาตุอาหารหลักและธาตุอาหารเสริมอื่นๆ ที่จำเป็นสำหรับพืชสมุนไพร การมีธาตุอาหารมากเกินไปหรือไม่เพียงพอ หรืออัตราส่วนธาตุอาหารที่ไม่สมดุล จะส่งผลต่อการเจริญเติบโตและพัฒนาการ รวมถึงคุณภาพของวัตถุดิบสมุนไพร และพืชแต่ละชนิดมีความต้องการธาตุอาหารที่แตกต่างกัน31,32,33] ตัวอย่างเช่น ความเครียดจากไนโตรเจนในระดับต่ำส่งเสริมการสังเคราะห์อัลคาลอยด์ในพืช Isatis indigotica และเป็นประโยชน์ต่อการสะสมฟลาโวนอยด์ในพืช เช่น Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge และ Dichondra repens Forst ในทางตรงกันข้าม ไนโตรเจนที่มากเกินไปจะยับยั้งการสะสมฟลาโวนอยด์ในพืชชนิดต่างๆ เช่น Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis และ Ginkgo biloba และส่งผลต่อคุณภาพของวัตถุดิบทางยา [34]. การใช้ปุ๋ยฟอสฟอรัสมีประสิทธิภาพในการเพิ่มปริมาณกรดไกลไซร์ไรซิกและไดไฮโดรอะซีโตนในชะเอมเทศอูราล [35] เมื่อปริมาณการใช้เกิน 0·12 กก.·ม. 2 ปริมาณฟลาโวนอยด์ทั้งหมดใน Tussilago farfara จะลดลง [36] การใช้ปุ๋ยฟอสฟอรัสมีผลเสียต่อปริมาณโพลีแซ็กคาไรด์ในเหง้าโพลีโกนาติซึ่งเป็นยาแผนจีนโบราณ [37] แต่ปุ๋ยโพแทสเซียมมีประสิทธิภาพในการเพิ่มปริมาณซาโปนิน [38] การใช้ปุ๋ย 450 กก.·ชม.−2 K ได้ผลดีที่สุดต่อการเจริญเติบโตและการสะสมซาโปนินของโสม Panax notoginseng อายุ 2 ปี [39] ภายใต้อัตราส่วน N:P:K = 2:2:1 ปริมาณรวมของสารสกัดไฮโดรเทอร์มอล ฮาร์พาจิด และฮาร์พาโกไซด์สูงที่สุด [40] อัตราส่วน N, P และ K ที่สูงมีประโยชน์ต่อการส่งเสริมการเจริญเติบโตของ Pogostemon cablin และเพิ่มปริมาณน้ำมันระเหย อัตราส่วน N, P และ K ที่ต่ำช่วยเพิ่มปริมาณส่วนประกอบหลักที่มีประสิทธิภาพของน้ำมันใบต้น Pogostemon cablin [41]. YCH เป็นพืชที่ทนต่อดินและแห้งแล้ง และอาจมีความต้องการธาตุอาหารเฉพาะ เช่น N, P และ K ในการศึกษานี้ เมื่อเปรียบเทียบกับ YCH ที่ปลูก พบว่าดินของต้น YCH ป่าค่อนข้างแห้งแล้ง โดยมีปริมาณอินทรียวัตถุ ไนโตรเจนทั้งหมด ฟอสฟอรัสทั้งหมด และโพแทสเซียมทั้งหมด ประมาณ 1/10, 1/2, 1/3 และ 1/3 ของปริมาณในดินของพืชที่ปลูกตามลำดับ ดังนั้น ความแตกต่างของธาตุอาหารในดินอาจเป็นอีกสาเหตุหนึ่งที่ทำให้เกิดความแตกต่างระหว่างสารเมตาบอไลต์ที่ตรวจพบใน YCH ที่ปลูกและ YCH ป่า Weibao Ma และคณะ [42] พบว่าการใส่ปุ๋ยไนโตรเจนและปุ๋ยฟอสฟอรัสในปริมาณหนึ่งช่วยเพิ่มผลผลิตและคุณภาพของเมล็ดพันธุ์ได้อย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม ผลของธาตุอาหารต่อคุณภาพของ YCH ยังไม่ชัดเจน จึงจำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเกี่ยวกับการใช้ปุ๋ยเพื่อปรับปรุงคุณภาพของวัสดุยา

ยาสมุนไพรจีนมีคุณสมบัติ “สภาพแวดล้อมที่เหมาะสมส่งเสริมผลผลิต และสภาพแวดล้อมที่ไม่เหมาะสมปรับปรุงคุณภาพ” [43]. ในกระบวนการเปลี่ยนผ่านอย่างค่อยเป็นค่อยไปจาก YCH ในป่าสู่ YCH ที่เพาะปลูก ถิ่นอาศัยของพืชได้เปลี่ยนจากทุ่งหญ้าทะเลทรายที่แห้งแล้งและแห้งแล้งไปสู่พื้นที่เกษตรกรรมที่อุดมสมบูรณ์และมีน้ำอุดมสมบูรณ์กว่า YCH ที่เพาะปลูกมีถิ่นอาศัยที่ดีกว่าและให้ผลผลิตสูงกว่า ซึ่งเป็นประโยชน์ต่อการตอบสนองความต้องการของตลาด อย่างไรก็ตาม ถิ่นอาศัยที่ดีกว่านี้นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในเมแทบอไลต์ของ YCH ว่าสิ่งนี้จะเอื้อต่อการปรับปรุงคุณภาพของ YCH หรือไม่ และจะบรรลุการผลิต YCH คุณภาพสูงผ่านวิธีการเพาะปลูกตามหลักวิทยาศาสตร์ได้อย่างไร จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติม

การเพาะเลี้ยงจำลองถิ่นที่อยู่อาศัยเป็นวิธีการจำลองถิ่นที่อยู่อาศัยและสภาพแวดล้อมของพืชสมุนไพรป่า โดยอาศัยความรู้เกี่ยวกับการปรับตัวในระยะยาวของพืชต่อความเครียดจากสภาพแวดล้อมที่เฉพาะเจาะจง43] โดยการจำลองปัจจัยสิ่งแวดล้อมต่างๆ ที่มีผลต่อพืชป่า โดยเฉพาะถิ่นที่อยู่เดิมของพืชที่ใช้เป็นแหล่งวัตถุดิบยาแท้ แนวทางนี้ใช้การออกแบบทางวิทยาศาสตร์และการแทรกแซงของมนุษย์ที่สร้างสรรค์เพื่อสร้างสมดุลระหว่างการเจริญเติบโตและการเผาผลาญรองของพืชสมุนไพรจีน43] วิธีการนี้มุ่งหวังที่จะบรรลุการจัดการที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการพัฒนาวัสดุยาคุณภาพสูง การเพาะปลูกในแหล่งที่อยู่อาศัยจำลองควรเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพสำหรับการผลิต YCH คุณภาพสูง แม้ว่าพื้นฐานทางเภสัชพลศาสตร์ เครื่องหมายคุณภาพ และกลไกการตอบสนองต่อปัจจัยด้านสิ่งแวดล้อมจะยังไม่ชัดเจน ดังนั้น เราจึงเสนอแนะว่าควรออกแบบทางวิทยาศาสตร์และมาตรการการจัดการภาคสนามในการเพาะปลูกและการผลิต YCH โดยอ้างอิงถึงลักษณะทางสิ่งแวดล้อมของ YCH ป่า เช่น สภาพดินที่แห้งแล้ง แห้งแล้ง และดินทราย ในขณะเดียวกัน นักวิจัยก็หวังว่างานวิจัยเชิงลึกเกี่ยวกับพื้นฐานของวัสดุฟังก์ชันและเครื่องหมายคุณภาพของ YCH มากขึ้น การศึกษาเหล่านี้สามารถให้เกณฑ์การประเมิน YCH ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้น และส่งเสริมการผลิตคุณภาพสูงและการพัฒนาอุตสาหกรรมอย่างยั่งยืน

รายละเอียด
น้ำมันสมุนไพร Fructus Amomi น้ำมันนวดธรรมชาติ เครื่องกระจายกลิ่น 1 กก. น้ำมันหอมระเหย Amomum villosum

วงศ์ขิงได้รับความสนใจเพิ่มขึ้นในการวิจัยอัลลิโลพาธี เนื่องจากน้ำมันหอมระเหยที่เข้มข้นและกลิ่นหอมของสายพันธุ์สมาชิก งานวิจัยก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าสารเคมีจาก Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] และ Zingiber officinale Rosc. [42] ในวงศ์ขิงมีฤทธิ์ทางอัลลิโลพาธีต่อการงอกของเมล็ดและการเจริญเติบโตของต้นกล้าข้าวโพด ผักกาดหอม และมะเขือเทศ การศึกษาปัจจุบันของเราเป็นรายงานฉบับแรกเกี่ยวกับฤทธิ์ทางอัลลิโลพาธีของสารระเหยจากลำต้น ใบ และผลอ่อนของ A. villosum (สมาชิกในวงศ์ Zingiberaceae) ผลผลิตน้ำมันของลำต้น ใบ และผลอ่อนอยู่ที่ 0.15%, 0.40% และ 0.50% ตามลำดับ ซึ่งบ่งชี้ว่าผลมีปริมาณน้ำมันหอมระเหยมากกว่าลำต้นและใบ ส่วนประกอบหลักของน้ำมันหอมระเหยจากลำต้น ได้แก่ β-pinene, β-phellandrene และ α-pinene ซึ่งเป็นรูปแบบที่คล้ายคลึงกับสารเคมีหลักของน้ำมันใบ β-pinene และ α-pinene (โมโนเทอพีนไฮโดรคาร์บอน) ในทางกลับกัน น้ำมันในผลอ่อนอุดมไปด้วยบอร์นิลอะซิเตตและการบูร (โมโนเทอร์พีนที่ถูกเติมออกซิเจน) ผลการวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนจากผลการวิจัยของ Do N Dai [30,32] และ ฮุยอ้าว [31] ซึ่งได้ระบุชนิดน้ำมันจากอวัยวะต่าง ๆ ของ A. villosum

มีรายงานหลายฉบับเกี่ยวกับฤทธิ์ยับยั้งการเจริญเติบโตของพืชของสารประกอบหลักเหล่านี้ในพืชชนิดอื่น ชาลินเดอร์ เคอร์ พบว่าอัลฟา-ไพนีนจากยูคาลิปตัสลดความยาวรากและความสูงของยอดของ Amaranthus viridis L. อย่างเห็นได้ชัดที่ความเข้มข้น 1.0 ไมโครลิตร [43] และการศึกษาวิจัยอีกกรณีหนึ่งแสดงให้เห็นว่า α-pinene ยับยั้งการเจริญเติบโตของรากในระยะแรกและทำให้เกิดความเสียหายจากออกซิเดชันในเนื้อเยื่อรากผ่านการเพิ่มการสร้างอนุมูลอิสระของออกซิเจน [44] รายงานบางฉบับแย้งว่า β-pinene ยับยั้งการงอกและการเจริญเติบโตของต้นกล้าของวัชพืชทดสอบในลักษณะการตอบสนองที่ขึ้นอยู่กับปริมาณยาโดยรบกวนความสมบูรณ์ของเยื่อหุ้มเซลล์ [45], การเปลี่ยนแปลงชีวเคมีของพืชและเพิ่มประสิทธิภาพการทำงานของเปอร์ออกซิเดสและโพลีฟีนอลออกซิเดส [46] β-Phellandrene แสดงการยับยั้งการงอกและการเจริญเติบโตของ Vigna unguiculata (L.) Walp ได้สูงสุดที่ความเข้มข้น 600 ppm [47] ในขณะที่ความเข้มข้น 250 มก./ลบ.ม. การบูรสามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของรากและยอดของ Lepidium sativum L. ได้ [48] อย่างไรก็ตาม งานวิจัยที่รายงานผลทางอัลลิโลพาธีของบอร์นิลอะซิเตทยังมีน้อย ในการศึกษาของเรา พบว่าผลทางอัลลิโลพาธีของ β-pinene, บอร์นิลอะซิเตท และการบูรต่อความยาวของรากอ่อนกว่าน้ำมันหอมระเหย ยกเว้น α-pinene ในขณะที่น้ำมันใบที่อุดมไปด้วย α-pinene ก็มีความเป็นพิษต่อพืชมากกว่าน้ำมันหอมระเหยจากลำต้นและผลของ A. villosum ทั้งสองผลการศึกษาชี้ให้เห็นว่า α-pinene อาจเป็นสารเคมีสำคัญที่ทำให้เกิดอัลลิโลพาธีในพืชชนิดนี้ ในขณะเดียวกัน ผลการศึกษายังบ่งชี้ว่าสารประกอบบางชนิดในน้ำมันผลที่มีปริมาณน้อยอาจก่อให้เกิดผลทางพิษต่อพืช ซึ่งการค้นพบนี้จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมในอนาคต

ภายใต้สภาวะปกติ ฤทธิ์อัลลิโลพาธีของสารอัลลิโลเคมีคอลจะจำเพาะต่อชนิดพันธุ์ เจียงและคณะพบว่าน้ำมันหอมระเหยที่ผลิตโดย Artemisia sieversiana ออกฤทธิ์รุนแรงต่อ Amaranthus retroflexus L. มากกว่า Medicago sativa L., Poa annua L. และ Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng49] ในการศึกษาอีกชิ้นหนึ่ง น้ำมันหอมระเหยของ Lavandula angustifolia Mill. ก่อให้เกิดฤทธิ์เป็นพิษต่อพืชในระดับที่แตกต่างกันในพืชแต่ละชนิด Lolium multiflorum Lam. เป็นชนิดที่ไวต่อสารรับมากที่สุด โดยการเจริญเติบโตของไฮโปโคทิลและรากประสาทถูกยับยั้งได้ 87.8% และ 76.7% ตามลำดับ ที่ปริมาณน้ำมัน 1 ไมโครลิตร/มิลลิลิตร แต่การเจริญเติบโตของไฮโปโคทิลในต้นกล้าแตงกวาแทบไม่ได้รับผลกระทบ [20ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นด้วยว่ามีข้อแตกต่างในความไวต่อสารระเหยของ A. villosum ระหว่าง L. sativa และ L. perenne

สารระเหยและน้ำมันหอมระเหยของสายพันธุ์เดียวกันอาจแตกต่างกันทั้งเชิงปริมาณและ/หรือเชิงคุณภาพเนื่องจากสภาวะการเจริญเติบโต ส่วนต่างๆ ของพืช และวิธีการตรวจจับ ตัวอย่างเช่น รายงานฉบับหนึ่งแสดงให้เห็นว่าไพรานอยด์ (10.3%) และเบตา-แคริโอฟิลลีน (6.6%) เป็นสารประกอบหลักของสารระเหยที่ปล่อยออกมาจากใบของ Sambucus nigra ในขณะที่เบนซัลดีไฮด์ (17.8%) อัลฟา-บัลเนซีน (16.6%) และเตตระโคเซน (11.5%) พบมากในน้ำมันที่สกัดจากใบ [50] ในการศึกษาของเรา สารประกอบระเหยที่ปล่อยออกมาจากพืชสดมีฤทธิ์ทางอัลลิโลพาธีต่อพืชทดสอบมากกว่าน้ำมันหอมระเหยที่สกัดได้ โดยความแตกต่างของการตอบสนองมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับความแตกต่างของสารอัลลิโลเคมีคอลที่มีอยู่ในสารทั้งสองชนิด ความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่างสารประกอบระเหยและน้ำมันจำเป็นต้องได้รับการศึกษาเพิ่มเติมในการทดลองต่อไป

ความแตกต่างของความหลากหลายของจุลินทรีย์และโครงสร้างชุมชนจุลินทรีย์ในตัวอย่างดินที่เติมน้ำมันหอมระเหยลงไปนั้นสัมพันธ์กับการแข่งขันระหว่างจุลินทรีย์ รวมถึงผลกระทบที่เป็นพิษและระยะเวลาของน้ำมันหอมระเหยในดิน Vokou และ Liotiri [51] พบว่าการใช้น้ำมันหอมระเหยสี่ชนิด (0.1 มล.) ลงในดินเพาะปลูก (150 กรัม) กระตุ้นการหายใจของตัวอย่างดิน แม้แต่น้ำมันแต่ละชนิดก็มีองค์ประกอบทางเคมีที่แตกต่างกัน ซึ่งบ่งชี้ว่าน้ำมันพืชถูกใช้เป็นแหล่งคาร์บอนและพลังงานโดยจุลินทรีย์ในดิน ข้อมูลจากการศึกษาปัจจุบันยืนยันว่าน้ำมันจากพืช A. villosum ทั้งต้นมีส่วนทำให้จำนวนเชื้อราในดินเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดภายในวันที่ 14 หลังจากเติมน้ำมัน ซึ่งบ่งชี้ว่าน้ำมันอาจเป็นแหล่งคาร์บอนสำหรับเชื้อราในดินได้มากขึ้น การศึกษาอีกชิ้นหนึ่งรายงานผลการศึกษาว่า จุลินทรีย์ในดินสามารถฟื้นฟูการทำงานและชีวมวลเบื้องต้นได้หลังจากช่วงเวลาหนึ่งที่มีการเปลี่ยนแปลงชั่วคราวจากการเติมน้ำมัน Thymbra capitata L. (Cav) แต่น้ำมันที่ได้รับในปริมาณสูงสุด (0.93 ไมโครลิตรต่อดิน 1 กรัม) ไม่สามารถทำให้จุลินทรีย์ในดินสามารถฟื้นฟูการทำงานเบื้องต้นได้ [52] ในการศึกษาปัจจุบัน จากการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของดินหลังจากผ่านการบำบัดด้วยวันและความเข้มข้นที่แตกต่างกัน เราคาดการณ์ว่าชุมชนแบคทีเรียในดินจะฟื้นตัวหลังจากผ่านไปหลายวัน ในทางตรงกันข้าม จุลินทรีย์ในเชื้อราไม่สามารถกลับคืนสู่สภาพเดิมได้ ผลการศึกษาต่อไปนี้ยืนยันสมมติฐานนี้: ผลกระทบที่ชัดเจนของน้ำมันที่มีความเข้มข้นสูงต่อองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในดินจากการวิเคราะห์พิกัดหลัก (PCoA) และการนำเสนอแผนที่ความร้อนยืนยันอีกครั้งว่าองค์ประกอบของชุมชนเชื้อราในดินที่ได้รับการบำบัดด้วยน้ำมัน 3.0 มก./มล. (คือ 0.375 มก. น้ำมันต่อดิน 1 กรัม) ในระดับสกุลมีความแตกต่างอย่างมากจากการบำบัดแบบอื่นๆ ปัจจุบัน งานวิจัยเกี่ยวกับผลกระทบของการเติมโมโนเทอร์ปีนไฮโดรคาร์บอนหรือโมโนเทอร์ปีนที่เติมออกซิเจนต่อความหลากหลายและโครงสร้างของชุมชนจุลินทรีย์ในดินยังคงขาดแคลน การศึกษาบางกรณีรายงานว่า α-pinene เพิ่มกิจกรรมของจุลินทรีย์ในดินและความอุดมสมบูรณ์สัมพันธ์ของ Methylophilaceae (กลุ่มของ methylotrophs หรือ Proteobacteria) ภายใต้ความชื้นที่ต่ำ โดยมีบทบาทสำคัญในฐานะแหล่งคาร์บอนในดินที่แห้งกว่า [53] ในทำนองเดียวกัน น้ำมันระเหยของพืช A. villosum ทั้งหมดที่มี α-pinene 15.03% (ตารางเสริม S1) ทำให้ความอุดมสมบูรณ์สัมพันธ์ของโปรตีโอแบคทีเรียเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดที่ 1.5 มก./มล. และ 3.0 มก./มล. ซึ่งชี้ให้เห็นว่า α-pinene อาจทำหน้าที่เป็นแหล่งคาร์บอนหนึ่งสำหรับจุลินทรีย์ในดิน

สารระเหยที่ผลิตโดยอวัยวะต่างๆ ของ A. villosum มีฤทธิ์ทางอัลลิโลพาธีในระดับต่างๆ ต่อ L. sativa และ L. perenne ซึ่งมีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับองค์ประกอบทางเคมีที่มีอยู่ในส่วนต่างๆ ของพืช A. villosum แม้ว่าองค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยจะได้รับการยืนยันแล้ว แต่สารระเหยที่ปล่อยออกมาจาก A. villosum ที่อุณหภูมิห้องยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด ซึ่งจำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติม นอกจากนี้ ผลเสริมฤทธิ์กันระหว่างสารอัลลิโลเคมีคอลต่างๆ ก็ควรค่าแก่การพิจารณาเช่นกัน ในส่วนของจุลินทรีย์ในดิน เพื่อศึกษาผลกระทบของน้ำมันหอมระเหยที่มีต่อจุลินทรีย์ในดินอย่างครอบคลุม เรายังจำเป็นต้องทำการวิจัยเชิงลึกเพิ่มเติม ได้แก่ การขยายระยะเวลาการบำบัดน้ำมันหอมระเหย และการวิเคราะห์ความผันแปรขององค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยในดินในแต่ละวัน

รายละเอียด
น้ำมัน Artemisia capillaris บริสุทธิ์สำหรับทำเทียนและสบู่ น้ำมันหอมระเหยสำหรับเครื่องกระจายกลิ่นแบบขายส่ง ใหม่สำหรับเครื่องกระจายกลิ่นแบบใช้เตาเผาไม้

การออกแบบโมเดลสัตว์ฟันแทะ

สัตว์ถูกแบ่งแบบสุ่มออกเป็น 5 กลุ่ม กลุ่มละ 15 ตัว หนูกลุ่มควบคุมและหนูกลุ่มจำลองถูกป้อนทางปากด้วยน้ำมันงาเป็นเวลา 6 วัน หนูกลุ่มควบคุมบวกถูกป้อนทางปากด้วยยาเม็ดไบเฟนเดต (BT, 10 มก./กก.) เป็นเวลา 6 วัน กลุ่มทดลองได้รับ AEO 100 มก./กก. และ 50 มก./กก. ละลายในน้ำมันงาเป็นเวลา 6 วัน ในวันที่ 6 กลุ่มควบคุมได้รับน้ำมันงา และกลุ่มอื่นๆ ทั้งหมดได้รับ CCl4 0.2% ในน้ำมันงา (10 มล./กก.) ครั้งเดียวโดยการฉีดเข้าช่องท้องจากนั้นให้หนูอดอาหารโดยไม่ดื่มน้ำ และเก็บตัวอย่างเลือดจากหลอดเลือดหลังลูกตา เลือดที่เก็บได้จะถูกปั่นเหวี่ยงที่ 3000 ×gเป็นเวลา 10 นาที เพื่อแยกเซรั่มภาวะกระดูกสันหลังส่วนคอเคลื่อนดำเนินการทันทีหลังจากการถอนเลือด และนำตัวอย่างตับออกทันที ตัวอย่างตับส่วนหนึ่งถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสทันทีจนกว่าจะวิเคราะห์ และอีกส่วนหนึ่งถูกตัดออกและแช่ในสารละลาย 10%ฟอร์มาลินสารละลาย; เนื้อเยื่อที่เหลือถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -80 °C เพื่อการวิเคราะห์ทางพยาธิวิทยา (หวางและคณะ, 2008-ซูและคณะ, 2009-นีและคณะ, 2015).

การวัดค่าพารามิเตอร์ทางชีวเคมีในซีรั่ม

การบาดเจ็บของตับได้รับการประเมินโดยการประมาณกิจกรรมของเอนไซม์ของ ALT และ AST ในซีรั่ม โดยใช้ชุดทดสอบเชิงพาณิชย์ที่เกี่ยวข้องตามคำแนะนำสำหรับชุดทดสอบ (หนานจิง มณฑลเจียงซู ประเทศจีน) กิจกรรมของเอนไซม์แสดงเป็นหน่วยต่อลิตร (U/l)

การวัดค่า MDA, SOD, GSH และ GSH-Pxในเนื้อตับที่เป็นเนื้อเดียวกัน

เนื้อเยื่อตับถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยน้ำเกลือเย็นในอัตราส่วน 1:9 (w/v, ตับ:น้ำเกลือ) เนื้อเยื่อตับถูกปั่นเหวี่ยง (2500 ×gเป็นเวลา 10 นาที เพื่อเก็บของเหลวใส (supernatant) สำหรับการวิเคราะห์ครั้งต่อไป ประเมินความเสียหายของตับตามการวัดระดับ MDA และ GSH รวมถึง SOD และ GSH-P ในตับxกิจกรรมต่างๆ ทั้งหมดนี้ถูกกำหนดตามคำแนะนำในชุดทดสอบ (เมืองหนานจิง มณฑลเจียงซู ประเทศจีน) ผลลัพธ์ของ MDA และ GSH แสดงเป็น nmol ต่อมิลลิกรัมโปรตีน (nmol/mg prot) และกิจกรรมของ SOD และ GSH-Pxถูกแสดงเป็น U ต่อมิลลิกรัมของโปรตีน (U/mg prot)

การวิเคราะห์ทางพยาธิวิทยา

ส่วนของตับที่เพิ่งได้รับมาถูกตรึงในบัฟเฟอร์ 10%พาราฟอร์มาลดีไฮด์สารละลายฟอสเฟต จากนั้นนำตัวอย่างไปฝังในพาราฟิน หั่นเป็นชิ้นขนาด 3–5 ไมโครเมตร ย้อมด้วยเฮมาทอกซิลินและอีโอซิน(H&E) ตามขั้นตอนมาตรฐาน และวิเคราะห์ในที่สุดโดยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง-เทียนและคณะ, 2012).

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ผลลัพธ์แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD) วิเคราะห์ผลโดยใช้โปรแกรมสถิติ SPSS Statistics เวอร์ชัน 19.0 จากนั้นนำข้อมูลไปวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA)p< 0.05) ตามด้วยการทดสอบ Dunnett's test และการทดสอบ Dunnett's T3 test เพื่อหาความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่างค่าของกลุ่มทดลองต่างๆ พบว่ามีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่ระดับp< 0.05.

ผลการศึกษาและการอภิปราย

ส่วนประกอบของ AEO

จากการวิเคราะห์ GC/MS พบว่า AEO มีองค์ประกอบ 25 ชนิดที่ถูกชะออกมาในเวลา 10 ถึง 35 นาที และระบุองค์ประกอบ 21 ชนิดที่คิดเป็น 84% ของน้ำมันหอมระเหยได้ (ตารางที่ 1). น้ำมันระเหยประกอบด้วยโมโนเทอร์พีนอยด์(80.9%), เซสควิเทอร์พีนอยด์ (9.5%), ไฮโดรคาร์บอนไม่แตกแขนงอิ่มตัว (4.86%) และอะเซทิลีนเบ็ดเตล็ด (4.86%) เมื่อเปรียบเทียบกับการศึกษาอื่นๆ (กัวและคณะ, 2004) เราพบโมโนเทอร์พีนอยด์จำนวนมาก (80.90%) ใน AEO ผลการศึกษาพบว่าองค์ประกอบที่พบมากที่สุดใน AEO คือ β-citronellol (16.23%) ส่วนประกอบสำคัญอื่นๆ ของ AEO ได้แก่ 1,8-cineole (13.9%)การบูร(12.59%),ลินาลูล(11.33%), α-ไพนีน (7.21%), เบต้า-ไพนีน (3.99%),ไทมอล(3.22%) และไมร์ซีน(2.02%) การเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบทางเคมีอาจเกี่ยวข้องกับสภาพแวดล้อมที่พืชได้รับ เช่น น้ำแร่ แสงแดด ระยะการเจริญเติบโต และโภชนาการ.

รายละเอียด
น้ำมัน Saposhnikovia divaricata บริสุทธิ์สำหรับทำเทียนและสบู่ น้ำมันหอมระเหยสำหรับเครื่องกระจายกลิ่นแบบขายส่ง ใหม่สำหรับเครื่องกระจายกลิ่นแบบใช้เตาเผาไม้

2.1. การจัดทำ SDE

เหง้า SD ซื้อในรูปแบบสมุนไพรแห้งจากบริษัท Hanherb (เมืองกูรี ประเทศเกาหลี) วัตถุดิบจากพืชได้รับการยืนยันทางอนุกรมวิธานโดย ดร. โก-ยา ชเว จากสถาบันการแพทย์แผนตะวันออกแห่งเกาหลี (KIOM) ตัวอย่างใบสำคัญ (หมายเลข 2014 SDE-6) ถูกเก็บรักษาไว้ในหอพรรณไม้สมุนไพรเกาหลีของ Standard Herbal Resources เหง้า SD แห้ง (320 กรัม) ถูกสกัดสองครั้งด้วยเอทานอล 70% (ด้วยกระบวนการรีฟลักซ์ 2 ชั่วโมง) จากนั้นนำสารสกัดไปทำให้เข้มข้นภายใต้ความดันต่ำ กรองยาต้ม ทำแห้งแบบไลโอฟิไลซ์ และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4°C ผลผลิตของสารสกัดแห้งจากวัตถุดิบตั้งต้นดิบคือ 48.13% (w/w)

2.2 การวิเคราะห์โครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงเชิงปริมาณ (HPLC)

การวิเคราะห์โครมาโทกราฟีดำเนินการโดยใช้ระบบ HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) และเครื่องตรวจจับโฟโตไดโอดแบบอาร์เรย์ สำหรับการวิเคราะห์ SDE ด้วย HPLC นั้น prim-Oมาตรฐาน -glucosylcimifugin ได้รับการสั่งซื้อจากสถาบันส่งเสริมอุตสาหกรรมยาแผนโบราณแห่งเกาหลี (คยองซาน เกาหลี) และเซก-โอ-กลูโคซิลฮาเมาดอล และ 4′-O-β-ดี-กลูโคซิล-5-O-เมทิลวิซัมมินอลถูกแยกได้ภายในห้องปฏิบัติการของเราและระบุโดยการวิเคราะห์สเปกตรัม โดยหลักแล้วใช้ NMR และ MS

ตัวอย่าง SDE (0.1 มก.) ถูกละลายในเอธานอล 70% (10 มล.) การแยกทางโครมาโตกราฟีดำเนินการด้วยคอลัมน์ XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 มม., 5μม. Waters Co., Milford, MA, USA) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยอะซีโตไนไตรล์ (A) และกรดอะซิติก 0.1% ในน้ำ (B) ที่อัตราการไหล 1.0 มิลลิลิตร/นาที ใช้โปรแกรมไล่ระดับหลายขั้นตอนดังนี้: 5% A (0 นาที), 5–20% A (0–10 นาที), 20% A (10–23 นาที) และ 20–65% A (23–40 นาที) สแกนความยาวคลื่นตรวจจับที่ 210–400 นาโนเมตร และบันทึกที่ 254 นาโนเมตร ปริมาตรที่ฉีดคือ 10.0μL. สารละลายมาตรฐานสำหรับการกำหนดโครโมนสามชนิดถูกเตรียมไว้ที่ความเข้มข้นสุดท้ายที่ 7.781 มก./มล. (ไพรม์-O-กลูโคซิลซิมิฟูจิน) 31.125 มก./มล. (4′-O-β-ดี-กลูโคซิล-5-O-เมทิลวิซัมมินอล) และ 31.125 มก./มล. (เซก-โอ-กลูโคซิลฮาเมาดอล) ในเมทานอลและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C

2.3. การประเมินฤทธิ์ต้านการอักเสบในหลอดทดลอง

2.3.1. การเพาะเลี้ยงเซลล์และการบำบัดตัวอย่าง

เซลล์ RAW 264.7 ได้มาจาก American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) และเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ DMEM ที่มียาปฏิชีวนะ 1% และ FBS 5.5% เซลล์ถูกบ่มเพาะในบรรยากาศที่มีความชื้นสัมพัทธ์ 5% CO2 ที่อุณหภูมิ 37°C เพื่อกระตุ้นเซลล์ อาหารเลี้ยงเซลล์ถูกแทนที่ด้วยอาหารเลี้ยงเซลล์ DMEM ใหม่ และไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ที่อุณหภูมิ 1μg/mL ถูกเติมในกรณีที่มีหรือไม่มี SDE (200 หรือ 400μกรัม/มล.) เป็นเวลาเพิ่มอีก 24 ชั่วโมง

2.3.2. การหาปริมาณไนตริกออกไซด์ (NO), โพรสตาแกลนดิน E2 (PGE2), ปัจจัยเนื้องอกเนโครซิส-α(งือออ-α) และการผลิตอินเตอร์ลิวคิน-6 (IL-6)

เซลล์ได้รับการบำบัดด้วย SDE และกระตุ้นด้วย LPS เป็นเวลา 24 ชั่วโมง การผลิต NO ได้รับการวิเคราะห์โดยการวัดไนไตรต์โดยใช้รีเอเจนต์ Griess ตามการศึกษาก่อนหน้านี้ [12]. การหลั่งของไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ PGE2, TNF-αและ IL-6 ถูกกำหนดโดยใช้ชุด ELISA (ระบบ R&D) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ผลของ SDE ต่อการผลิต NO และไซโตไคน์ถูกกำหนดที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรหรือ 450 นาโนเมตรโดยใช้เครื่อง Wallac EnVision™เครื่องอ่านไมโครเพลท (PerkinElmer)

2.4 การประเมินฤทธิ์ต้านโรคข้อเข่าเสื่อมในร่างกาย

2.4.1. สัตว์

หนู Sprague-Dawley ตัวผู้ (อายุ 7 สัปดาห์) ซื้อมาจาก Samtako Inc. (Osan, เกาหลี) และเลี้ยงภายใต้สภาวะควบคุมด้วยวงจรแสง/ความมืด 12 ชั่วโมง°C และ% ความชื้น หนูได้รับอาหารและน้ำจากห้องปฏิบัติการตามอำเภอใจขั้นตอนการทดลองทั้งหมดดำเนินการตามแนวทางของสถาบันสุขภาพแห่งชาติ (NIH) และได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ของมหาวิทยาลัยแทจอน (แทจอน สาธารณรัฐเกาหลี)

2.4.2. การเหนี่ยวนำให้เกิด OA ร่วมกับ MIA ในหนู

สัตว์ได้รับการสุ่มและกำหนดเข้ากลุ่มการรักษาก่อนเริ่มการศึกษา (ต่อกลุ่ม) สารละลาย MIA (3 มก./50μฉีดน้ำเกลือ 0.9% ลิตร) เข้าไปในช่องข้อเข่าขวาโดยตรงภายใต้การดมยาสลบที่เหนี่ยวนำด้วยส่วนผสมของเคตามีนและไซลาซีน หนูถูกแบ่งแบบสุ่มออกเป็นสี่กลุ่ม ได้แก่ (1) กลุ่มน้ำเกลือที่ไม่ได้รับการฉีด MIA (2) กลุ่ม MIA ที่ได้รับการฉีด MIA (3) กลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย SDE (200 มก./กก.) ซึ่งได้รับการฉีด MIA และ (4) กลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วยอินโดเมทาซิน (IM) (2 มก./กก.) ซึ่งได้รับการฉีด MIA หนูถูกให้ SDE และ IM ทางปาก 1 สัปดาห์ก่อนการฉีด MIA เป็นเวลา 4 สัปดาห์ ขนาดยา SDE และ IM ที่ใช้ในการศึกษานี้อ้างอิงจากที่ใช้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ [10-13-14].

2.4.3 การวัดการกระจายน้ำหนักของอุ้งเท้าหลัง

หลังจากการกระตุ้น OA ความสมดุลดั้งเดิมของความสามารถในการรับน้ำหนักของขาหลังถูกทำลายลง เครื่องทดสอบความคงทนต่อการรับน้ำหนัก (Linton instrumentation, Norfolk, สหราชอาณาจักร) ถูกใช้เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงของความคลาดเคลื่อนในการรับน้ำหนัก หนูถูกวางอย่างระมัดระวังในห้องวัด แรงรับน้ำหนักที่ขาหลังออกแรงถูกเฉลี่ยในช่วงเวลา 3 วินาที อัตราส่วนการกระจายน้ำหนักคำนวณได้จากสมการต่อไปนี้: [น้ำหนักที่ขาหลังขวา/(น้ำหนักที่ขาหลังขวา + น้ำหนักที่ขาหลังซ้าย)] × 100 [15].

2.4.4 การวัดระดับไซโตไคน์ในซีรั่ม

ตัวอย่างเลือดถูกปั่นที่ 1,500 กรัม เป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิ 4°C จากนั้นเก็บซีรัมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -70°C จนกว่าจะนำไปใช้ ระดับของ IL-1β, อิล-6, ทีเอ็นเอฟ-αและ PGE2 ในซีรั่มได้รับการวัดโดยใช้ชุด ELISA จาก R&D Systems (เมืองมินนิอาโปลิส รัฐมินนิโซตา สหรัฐอเมริกา) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

2.4.5. การวิเคราะห์ RT-PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์

สกัด RNA ทั้งหมดจากเนื้อเยื่อข้อเข่าโดยใช้ TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ถอดรหัสย้อนกลับเป็น cDNA และเพิ่มปริมาณด้วย PCR โดยใช้ชุด TM One Step RT PCR ที่มี SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) การวิเคราะห์ PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ดำเนินการโดยใช้ระบบ Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) ลำดับไพรเมอร์และลำดับโพรบแสดงไว้ในตาราง1. ส่วนของ cDNA ตัวอย่างและ cDNA ของ GAPDH ในปริมาณที่เท่ากันถูกเพิ่มปริมาณด้วยส่วนผสมหลัก TaqMan® Universal PCR ที่มี DNA polymerase ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Applied Biosystems, Foster, CA, USA) สภาวะ PCR คือ 2 นาทีที่ 50°C, 10 นาทีที่ 94°C, 15 วินาทีที่ 95°C และ 1 นาทีที่ 60°C เป็นเวลา 40 รอบ ความเข้มข้นของยีนเป้าหมายถูกกำหนดโดยใช้วิธีเปรียบเทียบ Ct (จำนวนรอบขีดจำกัด ณ จุดตัดระหว่างกราฟการขยายและค่าขีดจำกัด) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

รายละเอียด